猪场如何做好猪流行性腹泻的监测预警

猪流行性腹泻（PED）可造成各种年龄阶段的猪感染发病，发病日龄越小伤亡越严重，7日龄以内小猪死淘率可达80-100%。PED没有很好的治疗药物，关键是做好平时的预防。全面开展猪群PED的监测诊断和预警工作是科学防控的基础。猪场应做好猪群的日常临床观察和人员、车辆、物资、环境等的病原核酸监测，以及猪群的抗原、抗体监测，充分掌握猪群的感染压力和免疫状态，并根据监测结果采取针对性的防控措施。

1 加强入场人员、物资、环境等的监测

高发季节，周围PED疫情压力大，或者集团内部猪场存在PED时，猪场要严把入场关，对人员、车辆、物资等进行病原核酸监测，PEDV的监测可与非洲猪瘟的监测结合起来。如果检测有阳性的情况，则需采取更加严格的消毒隔离措施。

对猪场的内部环境，猪舍、淋浴间、过道等采集环境样品进行荧光RT-PCR检测，特别是猪场存在PEDV感染和循环传播时要加大监测的范围和频率。当环境中检测有PEDV阳性时，要加强猪场内部生物安全措施，做好消毒灭源工作，同时结合其他评价指标综合判定是否需要进行疫苗的紧急接种。

2 猪群的临床观察

要加强一线员工的培训，特别要对PED的危害、临床表现、采样方法、处置方案等进行反复培训和强化。猪场员工要密切关注猪群，凡是有呕吐、水样腹泻的情况，要引起高度重视，第一时间上报，并采取隔离、防交叉措施。同时，要采集腹泻猪粪便样品或肛拭子送实验室检测，猪场也可以采购PEDV、PoRV等免疫金标进行现场初筛。

3 异常猪只的采样确诊

当猪场疑似发生病毒性腹泻时，应立即采样送实验室检测。

3.1 发病小猪组织样品：腹泻明显的小猪处死（采集发病24小时内的），采集2-3窝，每窝选1-2头小猪。采集小肠组织做肠道病毒（TGEV、PEDV、PDCoV和RAV)检测，采集肺脏和脾脏做蓝耳、圆环、猪瘟、伪狂犬等病原检测。

3.2 粪便样品：用无菌棉签采集新鲜腹泻粪便样品， 放于离心管中，并做好标记。

3.3 肛拭子：用无菌棉签采集肛拭子，放于离心管中，并做好标记。

如果确诊为PEDV，猪场要立即采取干预措施：

（1）隔离、防交叉感染。将发病圈舍隔离，专人管理，严禁串舍。多准备几套清扫工具，发病栏和没发病栏的工具必须完全分开；

（2）严格粪便处理。将粪便先消毒，再清除，产房腹泻小猪的粪便用干粉消毒剂覆盖处理后再清扫；

（3）如果发生腹泻小猪的日龄小，并且刚发生几窝时，强烈建议整窝淘汰处理，发病产床严格消毒；

（4）全群紧急强化免疫。

刚发生腹泻时，干预措施要果断，不要抱有侥幸心理，防止病原蓄积，最终导致产房病毒性腹泻大爆发。

4 坚决落实母猪群的计划监测

1、后备母猪入群监测：入群前按比例采集后备猪的肛拭子样品（5混合1检测）、或按栏采集口腔唾液样品，用荧光RT-PCR检测。入群前最好能监测2次，间隔1-2周。如有阳性，应推迟入群，并结合PED抗体水平综合判定是否需要再强化免疫。可结合其他疫病的监测，采集血样进行PEDV抗体的检测，免疫抗体合格才能入群，抗体水平低的应及时强化免疫。

2、母猪产前监测：产前7-10天采集粪便样品监测（5混合1检测），如果有阳性，可适当推迟上产房，紧急强化灭活疫苗免疫，并采取更加严格的防交叉措施等。

3、猪群免疫抗体监测：结合其他疫病的日常监测增加PED血清IgA抗体检测项目，重点监测低胎龄母猪。

4、免疫后抗体水平及时评估：免疫前、二免前、二免后2-4周采集血清样品30份，检测IgA抗体水平；同时可结合乳汁IgA抗体进行监测。

5 常用实验室检测方法介绍

    1、病毒分离鉴定：PEDV分离和增殖常用Vero细胞，感染后会出现典型的细胞病变，以细胞融合、合胞体形成和细胞脱落为特征。而加入外源性胰蛋白酶有利于PEDV的增殖。用于病毒分离的样品最好是出现腹泻24小时以内小猪的空肠样品。通常PEDV的分离和培养比较困难，但华派生物腹泻研发团队有一套成熟的方法，单纯PEDV感染样品，荧光RT-PCR检测Ct值低于22的样品，成功分离率能达到90%左右。

    2、病毒核酸检测：RT-PCR和荧光RT-PCR是实验室最常用的PEDV核酸检测方法。荧光RT-PCR最常用，该方法快速、敏感，对组织样品、环境样品等都可以检测，不仅能判定阴性、阳性，而且可以实现定量分析。对PEDV阳性样品或分离培养物一般用RT-PCR方法扩增S1基因或S1基因的高可变区，经测序进行遗传进化分析。

     3、血清抗体检测：血清中和抗体效价测定是评价免疫效果的金标方法，但中和抗体的检测需要病毒培养，操作麻烦，不利于大规模检测。ELISA方法简便、快速、准确，是血清抗体检测最常用的方法。大量研究表明，猪群PEDV的IgA抗体水平与保护力呈正相关，能更好的测定猪群的免疫状态。不同的试剂盒，其判定标准和解读方案不同。检测数据要与生产情况想结合，用于指导猪场疫病防控。